Ngakak Sejenak Nyoook…


Mirip Rano Karno

Pada suatu hari, ada seorang perempuan muda naik bus. Perempuan itu mengambil tempat duduk bersebelahan dengan seorang bapak muda berkumis berumur sekitar 40-an. Sewaktu melihat bapak itu, perempuan itu setengah kaget dan langsung nyeletuk kegirangan.

“Eh?! Bapak sepertinya sering muncul di TV ya? Bapak, emm …? Bapak Rano Karno ya …?”
“Bukan, mbak. Saya bukan Rano Karno …” jawab bapak itu sambil tersenyum.

“Ah, beneran? Bapak pasti Rano Karno! Saya ngefans banget lho sama bapak!!”
“Ah, mbak ini … Beneran, mbak, saya bukan Rano Karno …” jawab bapak itu dengan kalem.
“Ayo deh, ngaku deh, Pak?! Bapak lagi menyamar jadi orang biasa ya …? Kok naik bus? Biar gak ketahuan kalau bapak Rano Karno kan?”

“Aduh, mbak ini … Asli, mbak, saya bukan Rano Karno. Saya dari kampung kok, mbak, ndak mungkin kalau saya Rano Karno …” bapak itu mencoba menjelaskan.

“Memang artis suka gitu kok, Pak, biar tidak mengundang perhatian. Udahlah, Pak, ngaku aja … Asyik deh bisa duduk bareng sama Rano Karno di bus, hihihi …, ayo dong, Pak, ngaku aja deh!!” dengan PD-nya perempuan itu memaksa si bapak untuk mengaku.

Kembali bapak itu bilang bahwa dia bukan Rano Karno, tapi perempuan itu terus mencecar dengan pertanyaan dan mendesak si bapak untuk mengaku.

“Bener,deh, sumpah! Bapak pasti Rano Karno! Ayo, ngaku, Pak!!”
Lama-lama, bapak itu merasa terganggu dan mulai hilang kesabarannya karena terus dipaksa untuk ngaku. Dengan jengkel, bapak itu menjawab dengan nada tinggi dan mata agak melotot,”Ya udah, mbak! Saya Rano Karno. Puas, mbak?! Terus, kalau saya Rano Karno, mbak mau bilang apa lagi?!!”

Mbak itu senyum-senyum lemes sambil menjawab,”Kok gak mirip ya …?”
Bapak : “#@%%*!!!!$$X//!!!”

Karena Gak Nurut Perintah Swami

Seorang istri yang bawel merayu suaminya dengan setengah maksa agar dibelikan perhiasan yang indah.

Karna tak tahan dengan rengekan si istri akhirnya si suami membelikan sebuah cincin berlian yang sangat indah buat si istri.

Tentu saja si istri sangat senang, tapi sebelum memberikan cincin itu si suami menyuruh si isteri berjanji.

Suami : Ma, ni cincin saya kasih tapi mama harus janji, bahwa mama gak akan pamer ke temen2 mama atau orang lain. dengan alasan apapun

Istri : Ok deh pap…
Suami : Bener ya ma, kalo mama melanggar janji, mama akan menyesal dan malu ..

Istri : Ok pa , kalo mama sampe ngelanggar janji , mama siap menanggung akibatnya.
Beberapa hari kemudian, sang istri marah marah hebat kepada suaminya …

Istri : Dasar papa keterlaluannnnnnnn…..
Suami : Kenapa Mam ?

Istri : Mau di taruh dimana wajah mama , tadi pas arisan temen2 ngolokin mama katanya cincin yang papi kasih tu imitasi . Mami maluuuuuuu…..

( Dengan entengnya ) suami menjawab : Kan sesuai janji, mama dah siap menanggung akibatnya kalo mama mamerin tu cincin ke temen2 mama.

Istri : Suami sialan ……!!!!

GADIS MATEMATIS DAN GADIS LOGIS, Pilih mana…????…

Ada dua orang gadis, salah satu dari mereka cara
berpikirnya MATEMATIS (M) dan yang lainnya cara
berpikirnya mengandalkan LOGIKA ( L) . Mereka berdua
berjalan pulang melewati jalan yang gelap, dan
jarak rumah mereka masih agak jauh. Setelah beberapa
lama mereka berjalan….

M : Apakah kamu juga memperhatikan, ada seorang pria
yang sedang berjalan mengikuti kita kira2 sejak
tigapuluh delapan setengah menit yang lalu? Saya
khawatir dia bermaksud jelek.

L : Itu hal yang Logis. Dia ingin memperkosa kita.

M : Oh tidak, dengan kecepatan berjalan kita seperti
ini, dalam waktu 15 menit dia akan berhasil menangkap
kita. Apa yang harus kita lakukan.

L : Hanya ada 1 cara logis yg harus kita lakukan,
yaitu berjalan lebih cepat.

M : Itu tidak banyak membantu, gimana nich…..

L : Tentu saja itu tidak membantu, Logikanya kalau
kita berjalan lebih cepat dia juga akan mempercepat
jalannya.

M : Lalu, apa yang harus kita lakukan? Dengan
kecepatan kita seperti ini dia akan berhasil menangkap
kita dalam waktu dua setengah menit…

L : Hanya ada satu langkah Logis yang harus kita
lakukan.. Kamu lewat jalan yang ke kiri dan aku lewat
jalan yang kekanan. sehingga dia tidak bisa mengikuti
kita berdua dan hanya salah satu yang diikuti
olehnya.

Setelah kedua gadis itu berpisah, ternyata Pria tadi
mengikuti langkah si gadis yang menggunakan logika
(L ). Gadis matematis ( M) tiba di rumah lebih dulu dan
dia khawatir akan keselamatan sahabatnya. Tapi, tidak
berapa lama kemudian, Ga dis Logika (L ) datang.

M : Oh terima kasih Tuhan.. Kamu tiba dengan selamat.
Eh, gimana pengalamanmu diikuti oleh Pria tadi?

L : Setelah kita berpisah dia mengikuti aku terus.

M : Ya.. ya.. Tetapi apa yang terjadi kemudian dengan
kamu?

L : Sesuai dengan logika saya langsung lari sekuat
tenaga dan Pria itupun juga lari sekuat tenaga
mengejar saya.

M : Dan… dan..

L : Sesuai dengan logika dia berhasil mendekati saya
di tempat yang gelap…

M : Lalu.. Apa yang kamu lakukan?

L : Hanya ada satu hal logis yang dapat saya lakukan,
yaitu saya mengangkat rok saya..

M : Oh… Lalu apa yang dilakukan pria tadi?

L : Sesuai dengan logika… Dia menurunkan
celananya…

M : Oh tidak… Lalu apa yang terjadi kemudian?

L : Hal yang logis bukan, kalau gadis yang mengangkat
roknya larinya lebih cepat dari pada lelaki yang
berlari sambil memelorotkan celananya… So akhirnya
aku bisa lolos dari pria itu…

PRAKTEK JURUS MERAYU CEWEK DARI EMAIL

Si Asep sedang membaca emailnya, dan ada artikel menarik tentang cara berkenalan dengan (baca: merayu) cewek. Salah satunya adalah dengan memulai perbincangan seperti berikut :

Cowok : “Maaf, mbak. Mbak punya obeng, ngga?”
Cewek : “Ha? Nggak..”
Cowok : “Kalo nomer hp punya kan?”

…..

Akhirnya, Asep Surasep ingin mencoba “rayuan maut” tersebut.
Dan… Di suatu taman…

Asep : “Maaf, mbak. Mbak punya obeng nggak?”
Cewek : “Punya… Mau yang plus atau minus?”
Asep : “Eh?!?,..ngg..yang minus aja mbak. Kalo palu punya nggak?”
Cewek : “Punya juga.. nih..”
Asep : “(Damn..) ?? Kalo kunci inggris, ada nggak?” (dengan penuh pengharapan agar si cewek menjawab “tidak”)
Cewek : “Ooo.. itu juga ada… dari ukuran 10 sampai 20. Mas mau yang mana?”
Asep : “(buset…).. DAAMMMN…!! F&^%**K…. To the point aja deh, mbak. Mbak punya nomer hape nggak?”
Cewek : “Ooo.. ini.. (sambil menyodorkan kartu nama dan brosur Ace hardware). Kalo mas butuh perkakas, hubungi saya aja. Saya kebetulan di bagian sales Ace Hardware, pusat perkakas yang terlengkap. Ace hardware gitu lho!!!…”
Asep : “….nasiiib….” (sambil pergi dengan tertunduk lesu..).

Dipublikasi di Uncategorized | Tinggalkan komentar

BUDIDAYA LELE SISTEM TERPAL


Teknik budidaya dengan metoda Kolam Terpal, ada banyak ukuran yang bisa digunakan, dengan asumsi untuk 1 meter kolam dapat menampung sebanyak 100 ekor ikan lele. Penulis sendiri memulainya dengan sekala percobaan yaitu menggunakan kolam ukuran 2 x 5m yang bisa diisi dengan benih sebanyak 1000 ekor.

Lahan yang digunakan harus lahan terbuka artinya tidak ada pohon yang menaungi secara langsung, kalaupun diperlukan pohon peneduh, maka jumlahnya tidak banyak dan hanya di sekeliling tepi lahan saja.

Berikut tahapan secara garis besar untuk persiapan kolam:

1. Pengerjaan tanah
Sebidang tanah ukuran 2 x 5m dikeruk atau digali sedalam 50 cm, ini penting untuk membantu terpal menahan beban air. Pastikan tanah telah dibersihkan dan harus rata, kemudian di tengah-tengah kolam buatlah cerukan kecil memanjang seperti parit untuk saluran air.
Tanah digali sedalam 50cm
 
 
 
Pembuatan parit di tengah
 
 
2.      Pembuatan rangka bambu
Setelah lahan sudah siap maka buatkanlah rangka dari bambu pada sekeliling kolam setinggi 1m dengan pola seperti pagar, pastikan ukuran rangka adalah 5 x 2 x 1,5m (P x L x T) sehingga pemasangan terpal nantinya akan mudah dengan ukuran yg presisi.
Rangka kolam
 
 
 
3.      Persiapan terpal
Belilah terpal dengan ukuran 5 x 8m, kemudian bersihkan menggunakan air dengan cara menggosoknya dengan lap dan diulang beberapa kali supaya zat-zat kimia pada terpal terbuang, tidak dianjurkan menggunakan sabun.

 Terpal yang telah dibersihkan
 
4.      Pemasangan terpal
Pasangkan terpal mengikuti bentuk rangka bambu dengan hati-hati supaya terpal tidak bocor, kemudian lipat bagian pojok terpal mengikuti bentuk rangka, setelah itu isilah dengan air. Rapikan terpal sambil pengisian air berlangsung, ini dapat membantu pemasangan terpal lebih mudah. Setelah terpal terpasang dengan rapi, selanjutnya ikatkan setiap ujung atau sisi terpal dengan tali rapia yang ditambatkan pada rangka bambu, kemudian lanjutkan pengisian air hingga ketinggian mencapai 50cm.
Pemasangan terpal sambil mengisi air
 
 
 
Ketinggian air 50cm
5.      Pemupukan kolam
Untuk menciptakan kondisi air yang ideal bagi tempat hidup lele, kita harus membuat pemupukan terlebih dahulu, ini demi mencapai PH air yg sesuai dg kebutuhan lele. Caranya dengan menggunakan kotoran kambing dan ramuan herbal (buatan Abah Nas), pertama kita masukan kotoran kambing pada karung sebanyak 15 kg, sebaiknya dibagi dua masing-masing 7,5 kg lalu cemplungkan kedalam kolam, biarkan menggantung dalam air jangan diberi pemberat. Kemudian siapkan 2 sendok garam dapur, setelah larutan diaduk selanjutnya disebar ke dalam kolam secara merata, biarkan kolam selama 8 hari (minimal).

 Kolam yang sedang dikompos (umur 6 hari)

Silakan diperiksa setelah dilakukan pemupukan kolam akan banyak dipenuhi plankton/jasad renik/jentik-jentik dan kolam siap untuk digunakan.

 
Dipublikasi di Uncategorized | Tinggalkan komentar

Rhizobium ; Bakteri symbiotik penambat N


I. PENDAHULUAN

 

1.1 Penambatan Nitrogen

Nitrogen  adalah  unsur yang  diperlukan  untuk  membentuk senyawa penting  di dalam  sel,  termasuk  protein,  DNA  dan  RNA.    Tanaman  harus  mengekstraksi kebutuhan  nitrogennya  dari  dalam  tanah.    Sumber  nitrogen  yang  terdapat  dalam tanah,  makin  lama  makin  tidak  mencukupi  kebutuhan  tanaman,  sehingga  perlu diberikan    pupuk  sintetik  yang  merupakan  sumber  nitrogen  untuk  mempertinggi

produksi.    Keinginan  menaikkan  produksi  tanaman  untuk  mencukupi  kebutuhan pangan,  berakibat  diperlukannya pupuk dalam  jumlah  yang banyak.

Industri  pupuk yang ada  belum dapat memenuhi kebutuhan pupuk yang semakin meningkat.  Untuk itu  perlu dicari  pupuk  nitrogen  alternatif  dan  rekayasa  gen hijau kelihatannya  dapat memberikan harapan untuk memenuhi kebutuhan pupuk di masa yang akan datang. Udara  yang  menyelubungi  bumi  mengandung  gas  nitrogen  sebanyak  80  %, sebahagian  besar  dalam  bentuk  N yang  tidak  dapat  dimanfaatkan.    Tanaman  dan   kebanyakan  mikroba  tidak  mempunyai  cara  untuk  mengikat  nitrogen  menjadi  senyawa dalam selnya.  Tanaman dan  mikroba umumnya mendapatkan nitrogen dari senyawa seperti ammonium  (NH4+) dan nitrat (NO3-).   Untuk memanfaatkan nitrogen dalam  bentuk  gas,  pakar  bioteknologi  memusatkan  perhatiannya  pada  hubungan antara  tanaman  dengan  jenis mikroba tertentu yang    dapat  menambat  nitrogen  dari udara  dan  menyusun atom  nitrogen  kedalam  molekul  ammonium,  nitrat,  atau senyawa lain yang dapat digunakan oleh tumbuhan (Prentis, 1984).

Tanaman kacang-kacangan   seperti  buncis dan kedelai, akarnya mempunyai bintil– bintil berisi bakteri yang mampu menambat nitro gen udara, sehingga nitrogen tanah yang  telah  diserap  tanaman  dapat  diganti.      Simbiosis  antara  tanaman  dan  bakteri saling menguntungkan  untuk  kedua  pihak.   Bakteri mendapatkan zat  hara  yang  kaya energi  dari tanaman inang sedangkan  tanaman inang  mendapatkan senyawa  nitrogendari bakteri untuk melangsungkan kehidupannya. Bakteri  penambat  nitrogen  yang  terdapat  didalam  akar  kacang-kacangan adalah  jenis  bakteri Rhizobium.   Bakteri ini   masuk melalui rambut-rambut akar  dan menetap dalam akar tersebut dan membentuk bintil pada akar yang bersifat khas pada kacang  –  kacangan.    Belum  diketahui  sepenuhnya  bagaimana rhizobium masuk melalui  rambut  –  rambut  akar,  terus  ke  dalam  badan  akar  dan  selanjutnya membentuk bintil – bintil akar.

Tabel 1.   Beberapa spesies Rhizob ium dan tanaman  simbiosanya

Spesies Rhizobium

Tanaman Simbiosisnya

R. leguminasorumR. phaseoliR. trifolii

R. melioti

R. lupini

R. japonicum

Rhizobium. spp

Pea (Pisum spp), lentil ( Lens culinaris)Kacang buncis (Phaseolus vulgaris)Clover ( Trifolium subteranim)

Alfafa (Medicago sativa)

Lupin (Lupinus, spp)

Kedelai ( Glycine max)

Cowpea (Vigna, spp), kacang tanah (Desmodium spp)

Untuk menambat nitrogen, bakteri ini menggunakan enzim nitrogenase, dimana enzim ini akan menambat gas nitrogen di udara dan merubahnya menjadi gas amoniak dan kemudian asetylen menjadi ethylen. Gen yang mengatur proses penambatan ini adalah gen nif (Singkatan nitrogen – fixation). Gen – gen nif ini berbentuk suatu rantai , tidak terpencar kedalam sejumlah DNA yang sangat besar yang menyusun kromosom bakteri, tetapi semuanya terkelompok dalam suatu daerah. Hal ini memudahkan untuk memotong bagian untaian DNA yang sesuai dari kromoson Rhizobium dan menyisipkanya ke dalam mikroorganisme lain (Prentis, 1984). Dengan rekayasa genetik telah berhasil ditransfer gen nif dari bakteri Rhizobium kedalam bakteri Escherechia coli , sehingga E. coli mampu untuk menambat nitrogen. Beberapa kelompok bakteri yang dapat dimanfaatkan untuk meningkatkan produksi tanaman adalah : (a) Rhizobium (bakteri penambat N2 yang bersimbiosis dengan kacang – kacangan, (b) Azotobakter, Azospirillum (bakteri penambat N2 yang tidak bersimbiosis dengan tanaman, (c) Bacillus subtilis, B. polymixa (bakteri penghasil senyawa yang dapat melarutkan fosfat tanah), (d) Clostridium dan (e) Pseudomonas fluorescens dan P. putia. Potensi penggunaan rizobakteria sebagai inokulan telah banyak mendapat perhatian dari pakar mikrobiologi tanah dan penyakit tanaman, karena sifat dari  rizobakteria ini  sangat agresif dalam mengkolonisasi akar menggantikan tempat mikroorganisme yang dapat menimbulkan penyakit pada tanaman. (Burr, 1978). Hubungan antara tanaman dan mikroorganisme terjadi di daerah rizosfer, mikroorganisme dapat hidup dari substrak yang dikeluarkan oleh tanaman melalui  akar ataupun tanaman yang mati, disamping itu dapat juga merangsang pengeluaran unsur hara dari akar (Vancura, 1964), dapat menghasilkan senyawa – senyawa yang mempercepat pertumbuhan (Bowen dan Rovira, 1961).

Beberapa keuntungan dengan memanfaatkan kelompok mikroorganisme ini

adalah :

  1. tidak mempunyai bahaya atau efek sampingan,
  2. Efisiensi penggunaan yang dapat ditingkatkan sehingga bahaya pencemaran lingkungan dapat dihindari,
  3. harganya yang relatif murah
  4. Teknologinya yang sederhana. Pemanfaatan kelompok mikroorganisme ini telah diterapkan di negara – negara maju dan beberapa negara berkembang.

1.2 Mikrobia penambat nitrogen

Sumber utama N berasal dari gas N2 dari atmosfir. Kadar gas nitrogen di atmosfir bumi sekitar 79% dari volumenya. Walaupun jumlahnya sangat besar tetapi belum dapat dimanfaatkan oleh tanaman tingkat tinggi, kecuali telah menjadi bentuk yang tersedia. Proses perubahan tersebut: (1). Penambatan oleh mikrobia dan jazad renik lain. Jazad renik ada yang hidup simbiotis dengan tanaman tanaman legum (kacang-kacangan) maupun tanaman non legum, (2). Penambatan oleh jazad-jazad renik yang hidup bebas di dalam tanah atau yang hidup pada permukaan organ tanaman seperti daun, dan (3). Penambatan sebagai oksida karena terjadi pelepasan muatan listrik di atmosfir.

Jumlah nitrogen yang ditambat oleh rhizobia sangat bervariasi tergantung strain, tanaman inang serta lingkungannya termasuk ketersediaan unsur hara yang diperlukan. Selandia Baru merupakan negara yang sangat mementingkan penggunaan pupuk nitrogen berasal dari penambatan N dari atmosfir.

Banyak genus rhizobia yang hanya dapat hidup menumpang pada tanaman inang tertentu (spesifik). Sebagai contoh bakteri yang bersimbiosis dengan kedelai (Soybean) umumnya tidak dapat bersimbiosis dengan dengan tanaman alfalfa (Medicago). Agar kemampuan menambat nitrogen tinggi maka tanaman inang harus dinokulasi dengan inokulan yang sesuai.

Fiksasi nitrogen sangat penting untuk lingkungan dan pertanian berkelanjutan (Sustainabele agriculture). Sebagian besar tanaman mengasimilasi nitrogen hanya dari tanah melalui penambahan pupuk. Sumber alternatif lain adalah Rhizobia yang mampu meyebabkan pembentukan nodula pada akar dari tanaman legum sebagai tanaman inang. Organ tanaman khusus diserang oleh bakteria yang memfiksasi nitrogen dalam  keadaan bakteroid endosimbiotik dalam sel tanaman. Proses ini melibatkan pengenalan spesifik dan diferensiasi berkembang baik bakteri dan sel tanaman inang. Rhizobia berhadapan dengan bermacam-macam kondisi lingkungan seperti bakteria yang hidup bebas dalam tanah, selama proses infeksi dan seperti diferensiasi bakteroid dalam sel  tanaman. Kapasitas rhizobia untuk beradaptasi terhadap perubahan kondisi lingkungan adalah sangat penting untuk keberadaanya dalam ekosistem dan interaksi simbiotik.

 II. SIMBIOSIS RHIZOBIA DAN TANAMAN LEGUM

 

2.1 Taksonomi Rhizobia

 Spesies yang terdaftar disini hampir semua valid/sah yang dipublikasikan namanya sebagai Rhizobia, yang mana berisi 62 spesies yang ditemukan dalam 12 genera. Rhizobia adalah bakteri pemfiksasi nitrogen yang membentuk nodula akar dalam tanaman legum. Hampir semua spesies bakteria ini adalah family Rhizobiaceae dalam alpha-proteobacteria dan salah satunya Rhizobium, Mesorhizobium, Ensifer atau genera Bradyrhizobium. Bagaimanapun, penelitian akhir-akhir ini telah menunjukkan bahwa terdapat spesies lain dari Rhizobia ini.

Dalam beberapa kasus spesies baru ini telah membangun melalui transfer gen lateral dari gen simbiotik. Genus Rhizobium (Frank, 1889) awal mulanya berasal dari bahasa latin yang artinya hidup di akar dan untuk beberapa tahun ini merupakan genus untuk semua Rhizobia. Beberapa spesies kemudian pindah menjadi genera baru berdasarkan analisis pilogenetik. Dan sekarang ini meliputi 16 spesies.

1. Rhizobium

Rhizobia adalah kelompok organisme yang sangat kecil (mikroorganisme) yang hidup di dalam tanah. Rhizobia adalah bakteria yang bersel satu/tunggal, panjangnya sekitar 1.000 mm.

1. Rhizobium cellulosilyticum

2. Rhizobium daejeonense 3. Rhizobium etli4. Rhizobium galegae

5. Rhizobium gallicum

6. Rhizobium giardinii

7. Rhizobium hainanense

8. Rhizobium huautlense

9. Rhizobium indigoferae

10. Rhizobium leguminosarum

11. Rhizobium loessense

12. Rhizobium lusitanum

13. Rhizobium mongolense

14. Rhizobium sullae

15. Rhizobium tropici

16. Rhizobium undicola

17. Rhizobium yanglingense

New 28/3/07 (García-Fraile et. al. 2007) corrected 17/12/06Type speciesformerly “Rhizobium hedysari

formerly “Rhizobium huanglingense

formerly Allorhizobium undicola

 

2. Mesorhizobium

Genus Mesorhizobium digambarkan oleh Jarvis et al. in 1997.. beberapa Spesies pindah dari Rhizobium ke dalam genus ini. Sekarang ini ada sekitar 11 spesies.

1. Mesorhizobium albiziae                 Baru 11-6-07 (Wang et. al., 2007)

2. Mesorhizobium amorphae

3. Mesorhizobium chacoense

4. Mesorhizobium ciceri                      dahulu Rhizobium ciceri

5. Mesorhizobium huakuii                   dahulu Rhizobium huakuii

6. Mesorhizobium loti                          dahulu Rhizobium loti, Type species

7. Mesorhizobium mediterraneum      dahulu Rhizobium mediterraneum

8. Mesorhizobium plurifarium

9. Mesorhizobium septentrionale        (ref)

10. Mesorhizobium temperatum          (ref)

11. Mesorhizobium tianshanense        dahulu Rhizobium tianshanense

3. Ensifer (dahulu Sinorhizobium)

Genus Sinorhizobium dipublikasikan oleh Chen et al. in 1988. beberapa studi akhir-akhir ini menunjukkan bahwa Sinorhizobium dan genus Ensifer (Casida, 1982) berada pada takson tunggal. Ensifer adalah sinonim heterotypic pertama dan kemudian menjadi prioritas (young, 2003). Ini artinya bahwa semua Sinorhizobium spp. harus berubah nama menjadi Ensifer spp mengikuti kode bakteriologi. Taksonomi dari genus ini diuji tahun 2007 oleh Martens et. al. Genus ini sekarang berjumlah 15 spesies.

  1. Ensifer abri Spesies ini berbeda dari Ensifer adhaerens, tetapi belum bisa dianamai Ensifer
  2. Ensifer americanum
  3. Ensifer arboris
  4. Ensifer fredii Formerly Rhizobium fredii, Type species
  5. Ensifer indiaense Spesies ini berbeda dari Ensifer adhaerens, tetapi belum bisa dianamai Ensifer
  6. Ensifer kostiense
  7. Ensifer kummerowiae
  8. Ensifer medicae
  9. Ensifer meliloti formerly Rhizobium meliloti
  10. Ensifer mexicanus New 19-2-07 (Lloret et. al. 2007)
  11. ‘Sinorhizobium morelense’
  12. Ensifer adhaerens Spesies ini juga dikenal sebagai  Sinorhizobium sahelense
  13. Ensifer saheli Spesies ini salah diketahui sebagai Sinorhizobium teranga
  14. Ensifer terangae Meskipun spesies ini telah dipublikasikan (Ogasawara, et. al. 2003), tetapi melum dimasukkan ke daftar sah (“Validation List”) International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology.

15. Ensifer xinjiangense

 

4. Bradyrhizobium

Genus Bradyrhizobium dipublikasikan oleh Jordan tahun 1982. Sekarang ini meliputi 5 spesies.

1. Bradyrhizobium elkanii

2. Bradyrhizobium japonicum             formerly Rhizobium japonicum, Type species

3. Bradyrhizobium liaoningense

4. Bradyrhizobium yuanmingense

5. Bradyrhizobium canariense

5. Azorhizobium

Genus Azorhizobium dipublikasikan oleh Dreyfus et al. tahun 1988. Sekarang ini meliputi 2 spesies;

1. Azorhizobium caulinodans              Type species

2. Azorhizobium doebereinerae          formerly Azorhizobium johannae

 

6. Methylobacterium

Genus Methylobacterium sekarang ini hanya berisi spesies rhizobial. Methylobacterium nodulans

 

7. Burkholderia

Genus Burkholderia sekarang ini berisi lima nama anggota rhizobial dan lainnya sebagai Burkholderia sp.

1. Burkholderia caribensis

2. Burkholderia cepacia

3. Burkholderia mimosarum               Baru 3/11/06

4. Burkholderia phymatum

5. Burkholderia tuberum

8. Cupriavidus : Cupriavidus dahulunya adalah Wautersia, formerly Ralstonia, yang baru-baru ini mengalami beberapa revisi taksonomi. Genus ini berisi spesies rhizobia tunggal. Cupriavidus taiwanensis

9. Devosia

Genus Devosia hanya berisi spesies rhizobia tunggal. Devosia neptuniae

 

10. Herbaspirillum

Genus Herbaspirillum sekarang ini berisi spesies rhizobia tunggal. Herbaspirillum lusitanum

 

11. Ochrobactrum

Genus Ochrobactrum sekarang ini berisi dua spesies rhizobia tunggal.

1. Ochrobactrum cytisi            baru 28/3/07 (Zurdo-Piñeiro et. al. 2007)

2. Ochrobactrum lupini

 

12. Phyllobacterium

Genus Phyllobacterium sekarang ini berisi dua spesies rhizobia tunggal.

Phyllobacterium trifolii

 

2.2. Morfologi dan Sitologi Rhizobium

Sel muda mengandung zat warna, merata kecuali strain dari R. Leguminosaarum dan R. trifolii sering berisi granule metachromatic. Sel yang tua umumnya lebih lama dalam mengabsorbsi warna dan unstainde area dari polihydroksi butirat (PHB) yang menandai morfologi. Sel muda bergerak dengan flagella yang salah satunya bisa secara polar atau peritritious. Rhizobia muda, pada media kultur berbentuk batang dan menjadi bakteroid dibawah kondisi tertentu, serupa dengan bentu rhizobia pada nodula.

2.3 Proses masuknya Rhizobium ke dalam Akar Legum

Rhizobium masuk ke dalam akar legum salah satunya melalui rambut akar atau secara langsung ke titik munculnya akar lateral. Akar yang atau pengontrol tumbuh dan cabang rambut akar adalah respons tanaman pertama yang dapat terlihat karena terinfeksi rhizobium. Meskipun demikian, nodula tanaman legum umumnya nampaknya mengandung hanya satu strain dari Rhizobium menjadikan akar tanaman dapat membentuk nodula dengan lebih dari satu strain.

Dilaporkan bahwa strains Rhizobium mampu menginfeksi legum dengan

melepaskan polisakarida spesifik yang menyebabkan lebih banyak aktivitas pektolitik oleh akar. Beberapa berpendapat bahwa robekan mekanik dengan rhizobium masuk ke dinding rambut akar yang pecah. Rhizobium juga bisa terperangkap sampai membungkus rambut akar yang telah berubah bentuk.

Bagaimana sebenarnya nodula dibentuk ? Infeksi benang masuk dan berpenetrasi ke dalam akar dari sel ke sel. Sel ini terbagi membentuk jaringan nodula dimana bakteria ini terbagi dan menggandakan diri. Batas pemisah berkembang, lokasi pusat dimana bakteria berada, jaringannya dinamakan zona bakteria yang ditandai dengan nodula dari bakteria yang nenyerangnya- jaringan bebas dinamakan korteks nodula. Jaringan nodula tumbuh dalam berbagai ukuran, mendorong dirinya melalui akar dan kemudian muncul sebagai tambahan dalam sistem perakaran. Ukuran dan bentuknya bergantung pada spesies dan tanaman legumnya.

Ada dua tipe nodula, yaitu efektif dan inefektif. Nodula efektif dibentuk oleh strains efektif dari Rhizobium. Nodula ini berkembang dengan baik, berwarna merah muda akibat adanya pigmen leghaemoglobin. Jaringan bakteroid berkembang baik dan terorganisasi dengan baik dengan banyak bakteroid. Berbeda dengan strain inefektif dari Rhizobium bentuk nodula inefektif umumnya kecil dan berisi sedikit jaringan bakteroid yang berkembang, menunjukkan akumulasi tepung dalam sel tanaman inang yang tidak berisi Rhizobium. Bakteroid dalam nodula inefektif berisi glikogen.

2.4. Proses pembentukan Nodula pada Tanaman Legum oleh Rhizobium

Tanaman legum dalam kondisi ternodulasi oleh bakteri pemfiksasi N bersimbiosis dengan bakteria tanah dari genus Rhizobium, Bradyrhizobium, Azorhizobium, Mesorhizobium and Sinorhizobium. Interaksi antara bakteri rhizobium dengan tanaman legum dikendalikan oleh tanaman inang tertentu. Misalnya S. meliloti membentuk nodule pada alfafa dan B. japonicum membentuk nodula pada kedelai. Tanaman inang nya tertentu, ditentukan dengan paling sedikit dua tahap perubahan sinyal yang saling bergantian antara tanaman dan mikrosimbiotik (Gambar 8).

Pertama, gen bakteri nodulasi (nod) aktif dalam merespons sinyal molekul yang dikeluarkan tanaman seperti flavonoids, dihasilkan dari biosintesis dan sekresi lipochitooligosaccharides (LCOs) oleh bakteri rhizobium. Tahap kedua, LCOs mendatangkan bentuk nodul pada akar tanaman inang dan memicu proses infeksi.  LCOs yang menyebabkan bentuk akar bernodula pada tanaman inang dinamakan factor Nod.

2.5. Peran Nitrogenase dalam Proses Fiksasi Nitrogen

Fiksasi Nitrogen dilakukan oleh bakteri. Bakteri ini menyelenggarakan fiksasi nitrogen yang terjadi baik oleh bakteri yang hidup bebas atau hidup bersimbiosis dalam akar tanaman legum seperti kedelai, clover, dan buncis. Fiksasi Nitrogen ini melibatkan penggunaan ATP dan proses reduksi ekivalen berasal dari metabolisme primer. Semua reaksi yang terjadi dikatalisis oleh nitrogenase. 8H+ + N2 + 8 e + 16 ATP + 16 H2O  2 NH3 + H2 + 16 ADP + 16 Pi + 16 H+

Nitrogenase adalah dua protein kompleks. Satu komponen, dinamakan nitrogenase reduktase (NR) adalah besi (Fe) berisi protein yang menerima elektron dari ferredoxin, reduktat kuat, dan kemudian mengirimkannya kekomponen lainnya dinamakan nitrogenase atau M0Fe protein (Iron-Molybdenum Protein).

Cukup banyak sistem fiksasi nitrogen berisi enzim, hydrogenase, yang memanen elektron dari molekul hidrogen dan mentransfernya kembali ke dalam Nitrogenase pertama kali menerima elektron dari NR dan proton dari larutan. Nitrogenase mengikat molekul dari molekul nitrogen (melepaskan H2 pada waktu yang sama) , dan kemudian menerima elektron dan proton dari NR, menambahkannya ke dalam molekul N2, akhirnya melepaskan dua molekul amoniak NH3. Melepaskan molekul hidrogen, H2, rupanya adalah bagian yang hakiki dari fiksasi nitrogenferredoxin, kemudian menyimpan beberapa energi metabolik yang hilang selama reduksi nitrogen.

Bagian utama dari energi fotosintesis dalam tanaman yang bernodula digunakan untuk fiksasi N2. Paling tidak enam belas molekul ATP dihidrolisis selama reduksi oleh molekul nitrogen tunggal. Pengeluaran energi dari fotosintesis sama sekali membatasi pertumbuhan tanaman yang memfiksasi nitrogen. Contohnya, hasil penggunaan energy (protein, karbohidrat, dan minyak) dari lahan jagung lebh banyak daripada dari lahan kedelai.

Nitrogen sangat sensitif terhadap oksigen. Akar bernodula dari tanaman

pemfiksasi nitrogen berisi oksigen- mengikat protein, leghemoglobin, yang melindungi nitrogenase melalui pengikatan molekul oksigen. Mekanisme serupa dilakukan dalam nitrat reduktase dan nitrit reduktase. Kedua substansi ini dihasilkan dari ammonia melalui proses oksidasi. Bakteri tanaman dan tanah dapat mereduksi senyawa ini untuk menyediakan ammonia untuk metabolisme. Pupuk yang umum digunakan seperti ammonium nitrat, NH4NO3, menyediakan reduksi

nitrogen untuk pertumbuhan tanaman secara langsung, dan menyediakan substrat

untuk reduksi nitrat. NADH atau NADPH adalah donor elektron untuk nitrat reduktase, bergantug pada organismenya.

Langkah pertama adalah reduksi nitrat menjadi nitrit

NO3- + NADPH + H+   è   NO2- + NADP + H2O

Langkah kedua melibatkan nitrat reduktase yang mereduksi nitrit menjadi ammonia

NO2- + 7 H+ + 6 e    è   NH3 + 2H2O

NO- (nitrit) dan NH2OH (hydroxylamine) lanjutan dalam reaksi tetapi tidak

berdisosiasi dengan nitrit reduktase.

2.6 Teknik Kultur Rhizobium

Bahwa sedikit sekali jenis prokariotik yang dapat menfiksasi nitrogen, termasuk beberapa Cyanobakteria (Ganggang Hijau Biru), sejumlah bentuk yang hidup bebas nonphototrofik dan beberapa bentuk simbiotik (seperti Rhizobium). Tetapi bagaimana kita dapat mengisolasi mikroba penambat nitrogen ? Untuk melakukan ini, kita akan menggunakan suatu teknik yang dikembangkan oleh ahli mikrobiologi untuk mengisolasi mikroba dengan kemampuan biokimia khusus. Teknik itu dinamakan Elective atau Enrichment culture technique .Hal ini didasari oleh oleh prinsip umum, yaitu jika kita ingin mengisolat mikroba yang memiliki karakteristik biokimia yang unik, kita harus menyediakan medium tertentu sehingga hanya mikroba dengan karakteristik tertentu dapat tumbuh. Langkah-langkah memproduksi inokulan diantaranya sebagai berikut :

2.6.1 ISOLASI STRAINS RHIZOBIUM

 

1. Mengumpulkan dan menyiapkan nodula akar di lapangan

Botol untuk sampel akar berisi silika gel untuk menghindari dari proses pembusukan dan mencegah dari serangan mikroorganisme tanah yang dapat mempengaruhi prosedur isolasi berikutnya. Kemudian akar yang bernodula dikumpulkan dan dimasukkan ke dalam botol yang ebrisi silika gel. Jika warna gel berubah menjadi merah muda/pink, desikan harus diganti oleh desikan biru secepat mungkin. Lalu berikan label yang berisi identifikasi sampel akar.

Hal yang perlu diperhatikan sebelum pengambilan sampling adalah :

a. Identifikasi lokasi

Negara, garis lintang dan garis bujur menggunakan GPS, kota terdekat pada

saat pengambilan sampling

b. Indentifikasi tanaman inang

Hal ini dianjurkan untuk dilakukan. Sampel tanaman legum diidentifikasi genus, spesies atau kultivarnya. Akan lebih baik bila kita mendokumentasikan tanaman legumnya. Jika ada kasus tanaman leguninosaseperti kedelai dan mung bean tumbuh di ladang petani, tanyakan varietas dari leguminosa tersebut dan konfirmasikan sejarah lahan/ladang tersebut berkaitan dengan inokulasi rhizobia.

c. Indentifikasi tanah

Mengumpulkan tanah dalam kantung plastil tertutup (ziplocs bag), dan

identifikasi tipe tanahnya, tekstur dan pH.

Mengumpulkan dan menyiapkan nodul akar

  • Menggali seluruh tanaman untuk mengambil bagian akar yang bernodula
  • Bersihkan tanah secara hati-hati disekitar akar yang bernodula
  • Lindungi Akar Yang Bernodula Dan Dikumpulkan Dengan menggunakan gunting.
  • Semua nodula yang berasal dari tanaman inang tunggal menwakili satu unit bahan yang dikumpulkan dan disimpan dalam botol yang sama. Akar bernodula yang berasal dari tanaman berbeda tetapi masih dalam satu spesie seharusnya tidak disatukan karena bisa saja berasal dari lingkungan tanah yang berbeda walaupun hanya beberapa meter saja jaraknya.
  • Botol yang berisi akar bernodula yang kering disimpan di lemari es pada suhu 5oC

 

2. Isolasi dari nodula segar

Akar legum segar yang dikumpulkan dari lapangan dibersihkan dengan air untuk membuang semua tanah dan partikel organik. Dengan menggunakan gunting tang, akar yang terinfeksi nodula dipotong hingga 2-3 mm setiap bagian dari nodula, utuh dan tidak rusak. Lalu mencelupkannya selama 10 detik ke dalam etanol 95% atau isopropanol dipindahkan ke larutan sodium hypoklorit 2.5 – 3% (v/v) atau clorox 1 : 1 (v/v) dan rendam selama 4-5 menit.

Nodula dihancurkan dalam pipa steril dengan tangkai gelas steril dan air yang steril. Slurry ditambahkan air dan kemudian piring berisi lapisan pada permukaan YMA (Yeast Manitol Agar) berisi congo red. Cawan petri yang berisi inokulan diinkubasi pada suhu 25-280C selama 3 sampai 10 hari, bergantung pada strain dan penampakan koloni yang spesifik. Koloni rhizobia adalah mucoid, bundar/bulat dan menunjukkan sedikit atau tidak ada absorpsi congo red. Isolat dari koloni rhizobia tunggal kemudian dimurnikan dan disebut sebagai Rhizobium melalui demonstrasi kemampuan bentuk nodula pada percobaan legum tanaman inangh dibawah kondisi bakteriologis yang terkontrol.

Metode lain adalah isolasi menggunakan jarum. Metode jarum ini terutama

berguna apabila nodula segar dipanen berukuran 2 mm atau berdiameter besar. Nodula pertama kali dicuci menggunakan air, kemudian masukkan ke dalam alkohol dan dipegang menggunakan gunting tang dan lewatkan ke dalam api. Permukaan akan steril, nodule diletakkan ke dalam kertas saring steril (2×2 cm) dalam cawan petridis. Setiap kertas saring berlaku untuk satu jarum

2.6.2. Produksi Inokulan Rhizobium

1. Persiapan Media tumbuh “Air Kaldu”

Rhizobia relatif mudah untuk ditumbuhkan dalam medium liquid. Sejak

rhizobia tidak berkompetisi dengan mikroorganisme lain, sangat penting untuk

mensterilkan semua bejana tumbuh dan medium sebaik mungkin untuk meyakinkan inokulasi dengan starter rhizobia dibawa lingkungan yang steril. Hal ini dapat dipengaruhi oleh medium kultur, strains rhizobia, temperatur dan aerasi.

Rhizobia merupakan bakteri aerobik dan memerlukan oksigen untuk pertumbuhannya. Hasil penelitian menunjukkan bahwa produksi inokulan rhizobia memerlukan aerasi 5 -10 liter air untuk 1 liter medium dalam 1 jam. Temperatur

optimum untuk pertumbuhan rhizobia sekitar 28 – 300C. Medium mensuplai energi, nitrogen, mineral garam tertentu dan faktor tumbuh.

Medium Yeast Manitol (YM) yang umum digunakan dalam kultur air kaldu rhizobia. Komposisinya adalah sebagai berikut :

Bahan-bahan                           g l-1

KH2PO4                                 0.5

MgSO4. 7 H2O                      0.1

NaCl                                        0.2

Manitol                                    10.0

Yeast Extract                          0.5

Air destilasi                             1.000 l

CHEMICAL               PURPOSE/NUTRIENT                     AMT/LITER

d-mannitol                   Carbon source, Energy                        10 gms

K2HPO4                     Phosphate, Potassium                                     0.5 gms

MgSO4.7H2O            Magnesium, Sulfur                              0.1 gms

NaCl                            Sodium, Chlorine                                0.2 gms

FeCl3.6H2O               Iron                                                     0.02 gms

Molybdic                     Acid Molybdenum                              0.002 gms

CaCO3                        Calcium                                               10 gms

Ditambah dengan air hingga satu liter

Ada juga yang menambahkan ekstrak ragi digunakan untuk suplement pertumbuhan bagi rhizobia. Alternatif lain adalah tepung segar dapat digunakan.

Untuk memproduksi “kultur air kaldu”, tempat atau bejana dalam berbagai

ukuran sering digunakan. Hal ini penting bahwa semua peralatan dalam keadaan steril dan “inlet air “ juga steril. Bejana diisi dengan media 1/3 sampai 2/3 dan disterilisasi pada autoclave . Kultur starter liquid diinokulasikan pada bejana dengan rasio 1-3 % (v/v) dari media. Waktu yang diperlukan untuk tumbuh rhizobia berada pada kisaran 3-7 hari, bergantung pada daya tumbuh strains rhizobia tersebut. Selama pertumbuhan rhizobia dalam starter dan kultur air kaldu sangat penting untuk melihat kontaminan dan mengontrol kepadatan rhizobia.

2. Produksi Carier Steril- Dasar Inokulan

Produksi memerlukan carrier/pembawa steril yang lengkap dalam paket steril. Cara sederhana adalah mencampurkan carier steril dengan kultur baketri liquid. Sterilisasi pendahuluan pada kantung pembawa/carier adalah dengan menyuntikkan zat aseptik pada kultur dengan jarum steril. Untuk produksi dalam skala besar , auto syringe” (automatic dispensing machine0) bias digunakan. Area tusukan harus didesinfeksi dengan etanol. Lubang bekas suntikan kemudia segera ditutup dengan label perekat. Kelembaban akhir dari inokulan seharusnya sekitar 45-50%. Setelah injeksi kantung yang berisi carier seharusnya 45-50%. Setelah penyuntikan, paket yang berisi carier harus ditempatkan pada temperatur dan area yang dikontrol tepat untuk membiarkan sel bakteri tumbuh mencapai populasi maksimum. Inokulan siap digunakan setelah 2 minggu. Ciri koloni bakteri Rhizobium :Putih bening, mengkilat, menonjol, tepian rata. Kontaminan (Agrobacterium) : warna merah

2.7 Teknik Inokulasi Rhizobium

Inokulum berisi bakteria yang harus senantiasa dijaga tetap hidup. Setiap paket yang berisi inokulum pada umumnya memiliki tanggal kadaluarsa. Setelah tanggal ini, bakteria tidak hidup dan inokulum seharusnya tidak diunakan lagi. Periode panas yang pendek dapat menurunkan jumlah Rhizobia yang hidup, paket yang berisi inokulum seharusnya disimpan di tempat dingin dan terhindar sinar matahari langsung. Penyimpanan yang lebih disukai oleh inokulum adalam dalam lemari es (tetapi bukan dalam freezer).

Bakteri hidup bisa ditambahkan pada tanah ((direct-soil application)) atau

diaplikasikan ke benih (seed-applied inoculant). Syarat-syarat inokulan rhizobium :

• Pembawa/carrier : gambut yang dinetralkan dg CaCO3 lolos saringan 200 mesh.

• Dikemas dalam plastik polietilen 0,05 mm

• Disterilisasi dengan sinar gama dosis 5,0 x 106 rads.

• Rhizobium dikulturkan dlm kaldu yeast manitol dg kepadatan 500 x 106

rhizobium hidup/ml.

• Kelembaban carrier 45 – 60 %.

• Diinkubasi 26oC selama 2 minggu.

• Disimpan dlm ruang suhu 4oC

• Standar Rhizobium pd inokulan 108 -109 sel hidup/g media

 

2.6.1. Aplikasi ke tanah (Direct-soil application)

Bentuk granular dari inokulum dapat ditempatkan dalam barisan benih melalui kotak insektisida atau melalui pupuk atau kotak benih (bersihkan kotak/box sebelum inokulum ditempatkan di dalamnya). Granul akan mengalir secara bebas melalui peralatan penanaman dan pengaliran inokulum ini sebaiknya dikalibrasi dan diukur. Konsentrasi liquid kultur inokulum yang dibekukan mungkin ditambah air agar mencair, kemudian tambahkan air ke dalam tangki untuk aplikasi penyemprotan ke dalam barisan benih. Inokulan sebaiknya tidak dicampur dengan pestisida atau pupuk jika diaplikasikan ke dalam barisan benih. Ketika benih tumbuh menjadi legum, dapat direkomendasikan bahwa pupuk dapat diaplikasikan sebagian. Aplikasi inokulan langsung ke dalam tanah sangat efektif.

Bagaimanapun, permukaan terbesar menjadi tertutup oleh inokulan memerlukan material yang lebih banyak. Hal ini terutama pada kasus ketika barisan kedelai ditanam terbatas. Akhirnya metode ini lebih mahal dibandingkan dengan inokulasi pada benih.

2.7.2 Aplikasi ke Benih (Seed-applied inoculant)

Inokulum yang akan dicampurkan ke dalam benih sebelum ditanam tersedia dalam bercam-macam carier/pembawa ; carier/pembawa yang umum adalah “peat”. (sejenis bahan organik). “Peat” menyediakan carier lebih baik dibandingkan carier lainnya melindungi kehidupan bakteria dibawah kondisi lingkungan yang tidak baik (tempertaur tinggi, keterlambatan penanaman). Inokulasi benih. Ketika benih diinokulsi, dua kondisi yang harus dijaga untuk memperoleh nodulasi yang baik : (1) akar harus kontak dengan bakteri Rhizobia dan (2) Rhizobia harus dalam kondisi hidup dan dapat menginfeksi akar tanaman.

Agar bakteria dapat kontak dengan akar tanaman, inokulum harus menutupi masingmasing benih. Untuk mencapai distribusi terbaik, inokulum seharusnya dicampurkan dengan benih dalam jumlah besar dibandingkan dismpan dalam kotak benih –menutupi lantai – dalam bak.

Gunakan bahan perekat (“sticker”) yang dapat membantu inokulan agar melekat pada masing-masing benih. Hal ini penting terutama pada benih legum yang sangat kecil, yang memerlukan lebih banyak inokulan per unit benih-area permukaan.

Perekat buatan sendiri dapat disediakan dengan pengenceran 1 -10 sirup atau molases, pengenceran cola atau susu dapat juga digunakan. Mencampurkan benih dan perekat secukupnya hanya untuk melembabkan semua benih. Terlalu cair dapat mengakibatakan perkecambahan yang prematur pada benih. Untuk melembabkan benih tambahkan inokulan pada lapisan benih. Pengeringan udara dengan menghamparkan benih pada kondisi teduh. Pengeringan bias dipercepat dengan menambahkan tambahan “peat” beralaskan inokulan atau batu kapur halus. Benih harus kering pada saat ditanam. Benih seharusnya sesegera mungkin ditanam setelah inokulasi sebab bakteria mulai mti pada proses pengeringan. Jika tidak ditanam dalam waktu 24 jam, inokulasi kembali.

Pre-inokulasi benih. Salah satu metode preinokulasi yang umum digunakan (1) meresapi (impregnation) Rhizobia dengan proses vakum atau (2) dibuat pil dengan

batu kapur halus. Tipe pil dari preinokulasi benih adalah umumnya lebih disukai pada penelitian dasar dan menunjukkan bahwa bakteria hidup lebih lama pada benih pil dan tipe preinokulasi benih menghasilan formasi jumlah nodula yang lebih banyak Preinokulasi benih seharusnya ditangani dengan cara yang sama seperti halnya paket inokulum. Beberapa tindakan pencegahan dapat menjamin hasil yang lebih baik. Mengecek kembali tanggal kadaluarsa pada kantong benih, penyimpanan dan tsimpan benih jangan dibawah sinar matahari langsung dan hindari panas dan tanam sesegera mungkin . Jika bakteria dipastikan dalm kondisi mati, inokulasi kembali benih. Jika air atau larutan perekat menyebabkan kandungan asam pada benih pil menjadi gum up, gunakan mineral oil (0.5 to 1.0 of oil per lb. of seed) untuk melekatkan inokulum baru pada benih.Tanam sesegera mungkin.

DAFTAR PUSTAKA

Aaron Fairc hild Azospirillium brasilianse.http://www . web.umr.edu. Diakses tanggal 11 Juni  2011.

Anke Beker. 2003. Symbiotic Plant-Microbe Interaction. www. cebitec.unibiefild.de.Dikases 1 Juni 2011.

Azotobacter.http://www.indiaagronet.com/indiaagronet/Manuers_fertilizers /azotoacter.htm. Diakses tanggal 11 Juni 2011.

Chen, Wen-Ming, James, Euan K., Coenye, Tom, Chou, Jui-Hsing, Barrios, Edmundo, deFaria, Sergio M., Elliott, Geoffrey N., Sheu, Shih-Yi, Sprent, Janet I., Vandamme,Peter. Burkholderia mimosarumsp. nov., isolated from root nodules of Mimosa spp. from Taiwan and South America. Int J Syst Evol Microbiol 2006 56: 1847-1851. Abstract

Davies, P.J. 1995. The Plant Hormones: Their nature, Occurance, and function. Di dalam Davies,  P.J.  (ed). Plant  Hormones:Physiology,  Biochemistry  and  Molecular Biology. Dordrecht: Kluwer Academic Publisers.

Hamdi, Y.A .. 2002. Application of Nitrogen fixing Systems in Soil Improvement andManagement. FAO and Agriculture Organization of  The United  Nations .FAO Soil Buletin. Rome.

Hindersah, R., & Setiawati, M.R. 1997. Upaya peningkatan efisiensi pemupukan N pada lahan marjinal dengan metode biologis dengan inikator tanaman tomat. Laporan Penelitian. Bandung: LP-UNPAD.

Hindersah,  R.,  Arief,  D.H.  &  Sumarni,  Y.  2000.  Kontribusi  hormonal Azotobcter chroococcum pada  pertumbuhankecambah  jagung sistem  kultur  cair. Prosiding Seminar Nasional Bioteknologi Pertanian.

Hindersah, R., Arifin,  M. &  Rudiwan, Y.  2002a. Pengaruh asam humat dan   supernatant Azotobacter  chrococcum terhadap pertumbuhan bibit selada (Lactuca Sativa L.) pada  Andisol.  Makalah  disampaikan  pada Seminar  Tahunan  Himpunan Ilmu Tanah di Mataram.

Hindersah,  R.,  Fitriatin,  B.N.  &  Setiawati,  M.R.  2003c. Azotobacter application  in agricultural  soil  management. Proceeding  International  Conference  on Environment and urban management.

Hindersah, R.,  Kalay,  A.M.  &  Setiani Muntalif, B. 2003 a. Pemanfaatan lumpur  instalasi pengolahan  limbah  domestik:  Studi  pendahuluan  terhadap  pertumbuhan vegetatif  jagung  manis  (Zea  mays L.  var.  saccharata  )  dan  mikroba  tanah. Makalah  disampaikan  pada Seminar Persatuan Mikrobiologi  Indonesia,  29-30 Agustus 2003 di Bandung

Impact  I  and  Impact  II  :  interactions  between  mic robial  inoculants  and resident populations in  the  rhizosphere  of agronomically  important crops  in  typical  soils http://www.ec.europa.eu . Diakses tanggal 11 Juni 2011.

R.E. Hulbert . 1999. Soil M icrobiology and Elec tive Culture Tehnique. http://www.slic2.edu

Shantharam,  S.  &  Mattoo,  A.K.  1997.  Enhancing  biological  nitrogen  fixation:  An appraisal  of  current  and alternative  technologies  for  N  input  into  plants. Plant and Soil 194: 205-216.

Valverde,  Angel,  Igual,  Jose  M.,  Peix,  Alvaro,  Cervantes,  Emilio,  Velazquez,  Encarna. Rhiz obium lusitanum sp. nov. a bacterium that nodulates Phaseolus vulgaris. Int J Syst Evol Microb iol 2006 56: 2631-2637. Abstract

Dipublikasi di Uncategorized | Tinggalkan komentar

Tekhnik Perbanyakan Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA)


Mikoriza merupakan suatu hubungan simbiotik mutualisme antara jamur tertentu dengan perakaran tanaman tingkat tinggi. Jamur membantu penyerapan unsur-unsur hara yang diperlukan tanaman, khususnya unsur P dan N, sedangkan tanaman menyediakan unsur karbon yang dibutuhkan jamur untuk kelangsungan hidupnya.

Mikoriza terdapat hampir di semua tanaman inang, baik tanaman pangan, hortikultura maupun perkebunan. Penyebaran mikoriza sangat luas dan dapat ditemukan di berbagai areal pertanaman di Indonesia, mulai dari daerah pegunungan sampai daerah pantai.

Mikoriza berperan dalam meningkatkan pertumbuhan tanaman dengan bertambahnya kemampuan akar dalam menyerap unsur-unsur hara yang dibutuhkan tanaman. Selain itu mikoriza juga berperan dalam meningkatkan ketahanan tanaman terhadap serangan patogen akar, ketahanan terhadap kekeringan atau kondisi ekstrim lainnya.

Klasifikasi Mikoriza

Secara umum mikoriza dapat digolongkan menjadi 2 kelompok, yaitu :
Endomikoriza/Mikoriza Vesikular Arbuskular (MVA)

Mikoriza dalam kelompok ini dicirikan dengan adanya struktur berupa vesikel dan arbuskul. Vesikel merupakan penggelembungan hifa MVA yang berbentuk bulat dan berfungsi sebagai tempat penyimpan cadangan makanan.

Arbuskul merupakan sistem percabangan hifa yang kompleks, bentuknya seperti akar yang halus. Arbuskul berfungsi sebagai tempat pertukaran nutrisi antara jamur dan tanaman.

MVA termasuk kelompok mikoriza yang berpotensi untuk dikembangkan sebagai pupuk hayati (biofertilizer). Adapun jenis-jenis MVA yang potensial tersebut diantaranya tergolong dalam genus Glomus, Gigaspora, dan Acaulospora.

Ektomikoriza

Mikoriza dalam kelompok ini dicirikan dengan adanya struktur berupa mantel hifa (Hartig net) yang berfungsi sebagai tempat pertukaran nutrisi. Mikoriza jenis ini tidak membentuk vesikel maupun arbuskul dan umumnya membentuk badan buah yang tergolong dalam kelas Basidiomycetes atau Ascomycetes.

Persiapan Perbanyakan MVA

Bahan yang perlu dipersiapkan yaitu media tanam (pasir, tanah, arang sekam atau yang lain), starter mikoriza (akar yang bermikoriza atau media yang mengandung spora MVA), benih jagung/sorghum, pupuk cair, pot/bak plastik/polibag, dan kantong plastik. Peralatan yang dibutuhkan antara lain dandang sabluk, cetok, gunting, hand sprayer, kompor, dll.

Produksi MVA

Umumnya produksi MVA yang sering dilakukan adalah dengan menggunakan metode pot kultur, yaitu menanam benih jagung dalam pot-pot atau bak-bak plastik. Tahap produksi MVA diawali dengan sterilisasi media. Media perbanyakan MVA yang berupa pasir/tanah/arang sekam dipanaskan dengan menggunakan dandang sabluk selama 1 – 2 jam. Tujuannya adalah untuk membunuh mikroorganisme yang hidup pada media tanam, sehingga diharapkan kompetisi antara MVA dan mikroorganisme lain menjadi berkurang.

Selanjutnya media dimasukkan ke dalam pot/polibag/bak plastik sampai ¾ volumenya. Tanam benih jagung/sorghum yang telah dikecambahkan terlebih dahulu. Benih jagung yang telah berkecambah akan meningkatkan persentase pertumbuhannya karena media tanam yang digunakan miskin unsur hara. Biarkan benih tumbuh sampai berumur 2 minggu dengan melakukan penyiraman secara teratur menggunakan hand sprayer.

Tahap selanjutnya adalah memasukkan starter mikoriza yang berupa akar yang bermikoriza/spora MVA di sekitar perakaran sebanyak 0,5 – 1 gram. Starter MVA yang dicampurkan minimal mengandung 10-20 spora.

Pemeliharaan

Tahap pemeliharaan dilakukan sampai inang berumur ±2 bulan. Tanaman jagung diletakkan pada suatu tempat yang cukup mendapatkan sinar matahari sambil sesekali dilakukan penyiraman dan pemupukan. Penyiraman tidak perlu dilakukan secara teratur, cukup dengan menjaga kelembapan media tanam. Pemupukan juga dilakukan secukupnya, dengan memilih pupuk cair yang mengandung unsur P rendah. Pemeliharaan tanaman yang telah tumbuh juga meliputi pengamatan terhadap serangan hama dan penyakit. Tanaman yang tampak terserang hama dan penyakit atau tumbuh abnormal segera dicabut dan diganti dengan benih yang baru.

Stressing

Tahap stressing adalah suatu tahapan yang berupa usaha untuk menghambat atau menekan pertumbuhan tanaman inang dengan kondisi tertentu. Tujuannya yaitu untuk  memacu MVA membentuk struktur tahan berupa spora. Spora inilah nantinya yang dapat dipanen dan menjadi sumber inokulum (starter mikoriza).

Usaha-usaha stressing yang dapat dilakukan adalah sebagai berikut :
Penghentian penyiraman

Setelah selama 2 bulan tanaman inang dipelihara dengan sesekali dilakukan penyiraman, maka pada bulan ketiga dilakukan stressing dengan menghentikan proses penyiraman selama 1 (satu) bulan. Dalam kondisi seperti ini secara otomatis akar tanaman inang akan berusaha keras untuk mendapatkan air. Pada saat inilah simbiosis antara MVA dan akar tanaman inang berjalan optimal. Hifa-hifa MVA akan tumbuh memanjang untuk membantu akar tanaman inang mencari sumber air.

Topping dan pemaparan sinar matahari

Topping atau pemotongan bagian atas tanaman inang dilakukan dengan hanya menyisakan batang bawah ± 1/4nya. Kondisi ini dikombinasikan dengan melakukan pemaparan tanaman inang di bawah bawah sinar matahari. Kondisi seperti ini akan semakin menekan kondisi fisik tanaman inang dan MVA. Perlahan-lahan tanaman inang akan mati sehingga akan mempengaruhi kondisi MVA. Dalam keadaan yang tidak menguntungkan tersebut MVA akan membentuk struktur tahan berupa spora untuk mempertahankan hidupnya.

Pemanenan

Pemanenan dapat dilakukan setelah tanaman inang mengalami stressing selama 1 (satu) bulan atau ± 3 (tiga) bulan sejak tanam awal. Pemanenan dilakukan dengan cara membongkar tanaman inang dan mengambil bagian akarnya. Akar lalu dipotong kecil-kecil (± 0,5 cm) dan dicampur dengan media tanamnya. Selanjutnya kemas mikoriza beserta media tanamnya dalam kantong plastik dan siap untuk diaplikasikan sebagai pupuk hayati. Bila tidak langsung digunakan maka sebaiknya disimpan dalam lemari es.

Aplikasi di Lapang

Penggunaan MVA lebih efektif diaplikasikan pada saat pembibitan karena MVA akan segera menginfeksi jaringan akar yang relatif masih muda. Dengan demikian bibit yang akan dipindahkan ke lapang perakarannya telah terlindungi oleh MVA sehingga dapat terhindar dari serangan patogen, khususnya patogen terbawa tanah. Namun dapat pula aplikasi dilakukan pada saat bibit dipindah ke lahan. Caranya yaitu dengan membuat lubang tanam, kemudian mengambil tanahnya dan mencampurnya dengan mikoriza. Dosis yang disarankan minimal 15 – 20 gram/bibit. Aplikasi sebaiknya dilakukan pada waktu sore hari (pukul 16.00 – 17.00 WIB).

*) Kasiono. Staf Pengajar Agrotekhnologi Fak. Pertanian Univ. Muara Bungo

Dipublikasi di Uncategorized | Tinggalkan komentar

Tundukkan Hati


Saudaraku,

Membaca, menyimak, dan merenungkan untaian mutiara kalimat hikmah para sholihin yang tertulis di banyak kitab acapkali membungkam hati kita. Bagaimana tidak? Karena tidak sedikit dari untaian mutiara-mutiara kalimat tersebut mampu menegur diri kita secara langsung, padahal kita sendiri tidak sedang berhadapan langsung dengan orang yang mengucapkannya.

Ada sebuah pesan, dimana sekiranya kita tidak pernah berjumpa dengan orang-orang sholeh di zaman dahulu, namun begitu, sesungguhnya kita masih bisa mengambil manfaat yang banyak dan besar dari ucapan-ucapan mereka yang sarat dengan nasehat mendalam, yang terangkum dalam banyak kitab yang terabadikan hingga kini.

Nasehat-nasehat tersebut begitu mudah menggetarkan hati kita. Bak anak panah yang tajam, yang dilepaskan oleh seorang ahli memanah, hingga meluncur tepat mengenai sasaran dan bagaikan tetesan air hujan di tengah padang hati yang tandus dari hijaunya petuah-petuah. Dan tiada hal lain yang mesti dilakukan saat mendapati nasehat-nasehat tersebut selain mengambilnya, dan menjadikan pengingat diri kita dalam setiap gerak kehidupan.

Saudaraku,

Sebelum tulisan ini saya akhiri, ada baiknya kita simak sepenggal untaian nasehat dari ahli hikmah berikut ini. Semoga bermanfaat dan membawa keberkahan bagi langkah hidup kita yang masih tersisa dan semoga Allah SWT senantiasa memberi kita taufiq dan hidayah untuk dapat mengamalkannya…insya Allah..aamiin.

“Jagalah olehmu delapan kalimat, nicaya Allah akan menjagamu:

1 Bila engkau sedang sholat, jagalah hatimu.

2 Bila engkau sedang berada di rumah orang lain, jagalah matamu.

3 Jika engkau berada di tengah umat manusia, jagalah lidahmu.

4 Jika engkau berada di meja perjamuan, jagalah perutmu.

5, 6, 7, dan 8 adalah, ingatlah akan dua hal dan lupakan dua hal lainnya. Adapun dua hal yang kita ingat adalah mengingat Allah dan kematian. Sedangkan dua hal yang kita lupakan ialah melupakan kebaikanmu kepada orang lain dan keburukan orang lain kepadamu”

Dipublikasi di Uncategorized | 2 Komentar

Mutiara Cinta,,,


CINTA yang AGUNG Adalah ketika kamu menitikkan air mata
dan MASIH peduli terhadapnya.

Adalah ketika dia tidak mempedulikanmu dan kamu MASIH
menunggunya dengan setia..

Adalah ketika dia mulai mencintai orang lain
dan kamu MASIH bisa tersenyum sembari berkata ‘Aku
turut berbahagia untukmu’

Apabila cinta tidak berhasil…BEBASKAN dirimu…
Biarkan hatimu kembali melebarkan sayapnya
dan terbang ke alam bebas LAGI ..
Ingatlah…bahwa kamu mungkin menemukan cinta dan
kehilangannya..
tapi..ketika cinta itu mati..kamu TIDAK perlu mati
bersamanya…

Orang terkuat BUKAN mereka yang selalu
menang..MELAINKAN mereka yang tetap tegar ketika
mereka jatuh

Dipublikasi di Uncategorized | Tinggalkan komentar